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液体菌种摇瓶制作技术

液体菌种摇瓶制作技术

一.试管的选择

选择刚满管或满管10天以内的试管。

二.培养基的制作

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1.液体培养基配方:土豆20%,麸皮4%,葡萄糖2%,蛋白胨0.3%,磷酸二氢钾0.2%,硫酸镁0.1%

2. 液体培养基的制作步骤 :土豆削皮挖去芽眼切块后和麸皮同煮,煮沸后文火维持20~30分钟,取滤汁,若不足补足水加入其它原料煮沸。分装每瓶500~600毫升。土豆要新鲜无绿皮和芽,麸皮也要是新鲜无霉变的麦麸。

取上口抽滤瓶洗净,小口套上20厘米长的胶管,装液后两个口子都要塞好棉花并包好报纸,手提高压锅灭菌40分钟,压力0.12~0.14之间。冷却后接种。高压锅排两次冷气,冷却压力降到0.03MPa时缓慢把高压锅内的压力排尽,打开盖放去余气后拿出瓶子把水倒掉再把摇瓶放进高压锅内,利用余热烘干棉塞。

三.接种

冷却后把摇瓶、母种、接种工具、气雾消毒盒等,放入接种箱气雾消毒盒消毒30分钟,先用酒精擦拭双手再进接种箱,在箱内用酒精棉球再次擦拭双手、母种、接种工具。把瓶子放到支架上调好倾斜角度,酒精灯火焰上方拔开棉塞,同样母种也在火焰上方拔去棉塞,接种钩火焰上灼烧后划去靠近试管口的菌种稍许,在老菌块上冷却后,用接种钩横划,在用接种铲竖划成0.5厘米见方的小块,接种铲铲取尽量少带琼脂,菌块还朝上每瓶接十块左右。接种后棉塞过火两圈后再塞上、包好报纸。恒温培养。


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四.培养

适温静止培养三、四天后,观察长势和有没有污染杂菌,确定没有染菌后放置于电磁摇床上,调整转速以产生1厘米深的漩涡为准,恒温培养,每天观察长势,随着菌丝量的增加转速会降低,始终保持1厘米深的漩涡。三、四天后就可培养完成,以放置20分钟后菌丝沉淀量达80%以上才可接种发酵罐。


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